酶联合吸附测定 (别名:酶联免疫吸附试验,酵素免疫分析法)
酶联免疫吸附试验(以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术。用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体,并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相载体表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除,最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。
基本信息
- 专科分类:生长发育检查检查分类:生化检查
- 适用性别:男女均适用 是否空腹:空腹
- 参考价格:25元
- 温馨提示:检查时服从医生的指导。
酶联合吸附测定正常值:
待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)
酶联合吸附测定临床意义:
异常结果:待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待检血清的OD值≥0.4,则判为阳性。
需要检查人群:检测抗原抗体。
酶联合吸附测定注意事项:
不适宜人群:无
检查前禁忌:准备好各种包装液,并配置好浓度。
检查时禁忌:1.严格控制影响标记效率的因素如温度、时间、pH、酶和抗体量等。
2.装层析柱时要使柱体均匀、柱面平整,无气泡、裂隙。
酶联合吸附测定检查过程:
常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
1.间接ELISA
本法主要用于检测抗体。间接ELISA的操作程序如下。
(1)材料
①包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;
②DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清.
③ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。
(2)方法步骤
①加抗原包被→4℃过夜,洗涤三次、抛干
②加待检血清→37℃2小时,洗涤三次、抛干
③加酶标抗体→37℃2小时,洗涤三次、抛干
④加底物液→37℃30分钟,加终止液
⑤用ELISA检测仪测定OD值,并计算出P/N比值。
2.双抗体夹心ELISA
本法主要用于检测大分子抗原。
①加抗体包被→4℃过夜,洗涤三次、抛干
②加待检抗原→37℃30分钟,洗涤三次、抛干
③加酶标抗体→37℃30分钟,洗涤三次、抛干
④加底物液→37℃15分钟,加终止液
⑤用ELISA检测仪测定OD值。
酶联合吸附测定不适宜人群:
不适宜人群:无。
酶联合吸附测定不良反应与风险:
无相关并发症和危害。