1989年参加无线电视举办的超级模特大赛。1991年，17岁的蔡少芬参加香港小姐竞选获得季军，后与香港电视广播有限公司签约而出道。1993年因主演古装剧《魔刀侠情》而走红；1994年出演古装电影《九品芝麻官之白面包青天》获得关注，1995年出演周星驰的经典无厘头电影《大话西游之月光宝盒》。1998年凭借《妙手仁心》荣获万千星辉颁奖典礼最佳女主角。
2002年主演历史剧《 》；2004年因主演古装神话剧《水月洞天》系列和《神鬼八阵图》而走红中国内地；2008年凭借《珠光宝气》入围第十五届上海白玉兰奖最佳女主角奖；2011年因出演宫斗剧《甄嬛传》中皇后一角再度走红。
2008年，蔡少芬与内地演员张晋结婚，并于2011年和2013年生下两个女儿。2014年3月25日，蔡少芬获得电视世界英艺奖。
2015年与配偶张晋参与录制《为她而战》节目。 同年，参加《偶像来了》。
人物关系：
丈夫：
主要作品：
电影《反贪风暴2》 饰：王漫玲 2016
演员：
古天乐饰：陆志廉
张智霖饰：刘保强
周渝民饰：宋仁信
林保怡饰：伦天源
石修饰：夏志贤
电视剧《甄嬛传》 饰：乌拉那拉·宜修 2011
导演：
演员：
孙俪饰：甄嬛
蒋欣饰：年世兰
陶昕然饰：安陵容
电视剧《创世纪》 饰：田宁 1999
演员：
罗嘉良饰：叶荣添
陈锦鸿饰：许文彪
古天乐饰：张自力
郭晋安饰：马志强
郭可盈饰：岑颖欣
电影《大话西游之大圣娶亲》 饰：铁扇公主 1995
演员：
周星驰饰：至尊宝、孙悟空、夕阳武士
朱茵饰：紫霞仙子、青霞仙子、盘丝大仙
莫文蔚饰：白晶晶
吴孟达饰：二当家、猪八戒
同年(公元1973年)出生的名人：